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QIAGEN公司轉(zhuǎn)染小分子RNA的槍兵利器

各大公司還在不斷研發(fā),加推新品,力求讓轉(zhuǎn)染實驗更簡便,轉(zhuǎn)染效率更高,毒性更低,或覆蓋過去未曾涉及的領域(如活體轉(zhuǎn)染)。那么,我們就來看看Qiagen公司帶來了哪些好東東。

FlexiTube sirna Premix 是典型的省時省力型試劑,它以單管形式提供了您感興趣基因的siRNA以及高效的轉(zhuǎn)染試劑,無需混合,即可直接用于細胞轉(zhuǎn)染。而傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)染實驗需要先稀釋 siRNA,再與轉(zhuǎn)染試劑混合并孵育。相比之下,此預混液可節(jié)約大量的時間和勞力。同時,F(xiàn)lexiTube siRNA Premix的使用也減少了實驗內(nèi)和實驗間的差異,保證了不同實驗間的高度一致性。

此外,F(xiàn)lexiTube siRNA Premix也不僅僅是簡單的混合,其中試劑與siRNA的比率已預先優(yōu)化過,確保高的轉(zhuǎn)染效率和基因沉默。你無需優(yōu)化siRNA與試劑的比例,可快速啟動RNAi 實驗,避免了冗長的實驗優(yōu)化過程。目前QIAGEN提供了針對人類和小鼠基因的FlexiTube siRNA Premix。

FlexiTube siRNA Premix中包含的FlexiTube siRNA是利用HP OnGuard siRNA Design 設計的,確保其具備高特異性。siRNA的設計基于人工智能設計程序,并結(jié)合大量的RNAi實驗數(shù)據(jù)。同時使用新的序列數(shù)據(jù)庫及**的同源性分析軟件對 siRNA 的設計進行檢測。

大家肯定關心轉(zhuǎn)染效率如何,當然這也是因細胞而異的。至于難搞的原代細胞和懸浮細胞,你可以嘗試一下加大用量。反之,如果你還想降低siRNA的終濃度,當然也可以,只需要使用更少量的FlexiTube siRNA Premix。例如,使用建議量的一半,這樣siRNA的終濃度即為12.5 nM。取決于不同的細胞類型,有時siRNA終濃度低至1 nM也能產(chǎn)生高效的基因沉默。

大家都清楚,省時省力的東西一般都不省錢,F(xiàn)lexiTube siRNA Premix當然也不例外。如果是單獨的FlexiTube siRNA,1 nmol約為930元,而Premix的目錄價為1770元,其中含有0.75 nmol siRNA。當然,也不能這么直接比較,畢竟你連轉(zhuǎn)染試劑的錢也省了。如果實驗室可以承受的話,這確實是個省事的好選擇。

另外,QIAGEN還帶來了HiPerFect轉(zhuǎn)染試劑的高通量版本 – HiPerFect HTS Reagent,能夠高通量地轉(zhuǎn)染siRNA/miRNA,適合通路分析、**開發(fā)及miRNA功能研究。對于高通量實驗而言,操作簡便、結(jié)果可靠和經(jīng)濟實惠都很關鍵。HiPerFect HTS試劑能同時滿足這幾點。索取資料

HiPerFect HTS試劑提供了穩(wěn)定可靠的轉(zhuǎn)染,確保了高通量實驗的一致性和可重復性。它的操作步驟也有所不同,目的是盡量減少耗材的使用,減少移液步驟,在節(jié)約資源和時間的同時也有利于標準化。

說明書中提供了在96孔板和384孔板中反式轉(zhuǎn)染貼壁細胞的操作步驟。在操作過程中,細胞可在同**接種和轉(zhuǎn)染。具體過程是,siRNA先加入孔中,再加入HiPerFect HTS試劑,在復合物形成之后,將細胞加入孔中。

除了塑料耗材的節(jié)省之外,每次轉(zhuǎn)染只使用少量的轉(zhuǎn)染試劑,確保大的經(jīng)濟效益,同時也不會折損結(jié)果的可靠性。HiPerFect HTS試劑本身也有一些優(yōu)勢,比如批次間一致性高,且稀釋后的穩(wěn)定性高。這些性質(zhì)對于實際操作也蠻重要,例如,你可以在早上稀釋,然后用一整天,轉(zhuǎn)染效果也不會打折。

目前,HiPerFect HTS試劑已經(jīng)成功轉(zhuǎn)染了一些細胞系,除了常見的293、HeLa等細胞系外,HUVEC和NHDF等原代細胞也能成功轉(zhuǎn)染。

HiPerFect HTS試劑目前有三種規(guī)格。迷你版(0.1 ml)的試劑適合初實驗,價格為560元,適用于4-10塊96孔板。而2×1 ml和6×1 ml的試劑分別為9600元和25200元。當然,如果真的用量很大,那應該會有一個不錯的折扣。

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